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Pourquoi la culture cellulaire lyse-t-elle d'abord les globules rouges ?

2022-12-23

Présentation de base
Le lysat d'érythrocytes est l'une des méthodes les plus simples et les plus faciles pour éliminer les globules rouges, c'est-à-dire diviser les globules rouges avec un lysat, qui n'endommage pas les cellules nucléées et peut éliminer complètement les globules rouges. Le clivage du lysat est une méthode douce d'élimination des globules rouges, qui est principalement utilisée pour la séparation et la purification des cellules tissulaires dispersées par digestion enzymatique, la séparation et la purification des lymphocytes et l'élimination des globules rouges dans les expériences de protéines tissulaires et nucléiques. extraction acide. Les cellules tissulaires obtenues par le lysat de globules rouges ne contiennent pas de globules rouges et peuvent en outre être utilisées pour la culture primaire, la fusion cellulaire, la cytométrie en flux, la séparation et l'extraction d'acide nucléique et de protéines, etc.

Mode d'emploi
Échantillon de cellules tissulaires
1. Des tissus frais ont été digérés par pancréas/enzyme ou collagénase et dispersés dans une suspension cellulaire unique, et le surnageant a été éliminé par centrifugation.

2. Prenez le lysat ELS du réfrigérateur à 4â, ajoutez le lysat ELS au précipité cellulaire dans un rapport de 1:3-5 (ajoutez 3-5 ml de lysat à 1 ml de cellule compactée), soufflez doucement et mélangez.

3. Centrifugez à 800-1000 tr/min pendant 5 à 8 minutes et jetez le liquide rouge transparent supérieur.

4. La partie précipitée a été recueillie et centrifugée avec une solution de Hank ou une solution de culture sans sérum pendant 2 à 3 fois.

5, si la fissuration n'est pas complète/complète peut être répétée les étapes 2 et 3.

6. Cellules de remise en suspension pour des expériences ultérieures ; Si l'ARN est extrait, il est préférable de le faire dans la solution préparée à partir de l'étape 4 en utilisant de l'eau DEPC

Les globules rouges ont un cycle de vie très court, seulement 120 jours, mais ils reproduisent le sang très rapidement, et dans ce cas ils sont particulièrement capables de division cellulaire, et ce sont les cellules qui se divisent le plus rapidement de toutes, donc cette cellule est très précieuse, il est donc très utile pour la culture cellulaire. C'est très simple, il ne contient aucun organite, juste des membranes cellulaires et des protéines.

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