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Quelles sont les fonctions du kit ELISA ?

2022-12-23

Le kit ELISA est basé sur une phase solide d'antigène ou d'anticorps et un marquage enzymatique de l'antigène ou de l'anticorps. L'antigène ou l'anticorps lié à la surface du support solide conserve toujours son activité immunologique, et l'antigène ou l'anticorps marqué par une enzyme conserve à la fois son activité immunologique et l'activité enzymatique. Au moment de la détermination, l'échantillon testé (dans lequel l'anticorps ou l'antigène est mesuré) réagit avec l'antigène ou l'anticorps à la surface du support solide. Le complexe antigène-anticorps formé sur le support solide est séparé des autres substances dans le liquide par lavage.

Des antigènes ou des anticorps marqués par une enzyme sont ajoutés, qui se lient également au support solide par réaction. A ce moment, la quantité d'enzyme dans la phase solide est proportionnelle à la quantité de substance dans l'échantillon. Après avoir ajouté le substrat de la réaction enzymatique, le substrat est catalysé par l'enzyme pour devenir des produits colorés. La quantité de produit est directement liée à la quantité de substance testée dans l'échantillon, de sorte qu'une analyse qualitative ou quantitative peut être effectuée en fonction de la profondeur de la couleur.

L'efficacité catalytique élevée des enzymes amplifie indirectement les résultats de la réponse immunitaire, rendant le test très sensible. ELISA peut être utilisé pour déterminer les antigènes, mais peut également être utilisé pour déterminer les anticorps.

Principes de base du kit ELISA
Il utilise une réaction spécifique de l'antigène et de l'anticorps pour connecter l'objet à l'enzyme, puis produit une réaction colorée entre l'enzyme et le substrat pour une détermination quantitative. L'objet de la mesure peut être un anticorps ou un antigène.

Trois réactifs sont nécessaires dans cette méthode de détermination :
â Antigène ou anticorps en phase solide (immuno-adsorbant)
â¡ Antigène ou anticorps marqué par une enzyme (marqueur)
â¢ substrat pour l'action enzymatique (agent de développement de la couleur)

Lors de la mesure, l'antigène (anticorps) est d'abord lié au support solide, mais conserve toujours son activité immunitaire, puis un conjugué (marqueur) d'anticorps (antigène) et d'enzyme est ajouté, qui conserve toujours son activité immunitaire et son enzyme d'origine. activité. Lorsque le conjugué réagit avec l'antigène (anticorps) sur le support solide, le substrat correspondant de l'enzyme est ajouté. C'est-à-dire l'hydrolyse catalytique ou la réaction et la couleur REDOX.

La nuance de couleur qu'il produit est proportionnelle à la quantité d'antigène (anticorps) à mesurer. Ce produit coloré peut être observé à l'œil nu, au microscope optique, au microscope électronique, peut également être mesuré au spectrophotomètre (instrument à marqueur enzymatique). La méthode est simple, pratique, rapide et spécifique.

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